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多克隆意味著可靠和優(yōu)越的信號(hào)
多克隆檢測(cè)試劑通過放大信號(hào),即使是來自表達(dá)不佳的目標(biāo),仍然提供J佳靈敏度。Jackson 多克隆抗體提供了異質(zhì)性抗體群體,每種抗體都有不同的副鏡檢測(cè)不同部分的壹級(jí)抗體。下圖表明,通過結(jié)合整個(gè)壹級(jí)抗體,而不是一個(gè)有限的特定位點(diǎn)/區(qū)域/序列,多克隆納米二級(jí)抗體可以大量修飾壹級(jí)抗體、實(shí)現(xiàn)更高的標(biāo)記效率和更亮的信號(hào)。
圖:滋養(yǎng)層染色,用JIR納米秒增強(qiáng)亞細(xì)胞成像。細(xì)胞角蛋白8(藍(lán)色)(DyLight 405 VHH片段抗兔子(611-474-215)、vinculin(綠色)(Alexa Fluor488 VHH片段防老鼠(615-544-214))和F-actin(紅色)。細(xì)胞角蛋白是一種中間絲,而管狀蛋白是一類局灶性粘連。用10%羊駝血清(028-000-001)阻斷兩幅圖像。圖片來源:Derek Sung,醫(yī)學(xué)博士/博士生·賓夕法尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院
據(jù)報(bào)道,VHH片段的獨(dú)特CDR(互補(bǔ)性確定區(qū)域)能夠獲得傳統(tǒng)抗體無法獲得的抗原表位(Bannas等人,2017年)。例如,VHH片段CDR3的長環(huán)結(jié)構(gòu)可能有助于與蛋白質(zhì)表面囊袋結(jié)合。
納米二級(jí)抗體出色的滲透性和間隙
由于納米體尺寸較?。–hakravarty et al 2014,Debie et al 2020,Hernández et al 2019),因此納米體表現(xiàn)出良好的組織滲透性,由于其擴(kuò)散系數(shù)低于常規(guī)抗體,納米體可以在組織中自由移動(dòng)(Jovevska and Muyldermans,2019)。不存在片段結(jié)晶(Fc)進(jìn)一步提高了分子與組織的清楚率,使其成為診斷成像技術(shù)(如Immuno-PET)的專業(yè)工具(Krasniqi等人,2018年)。
Jackson納米二級(jí)抗體利用這些獨(dú)特的特性,在無需長時(shí)間孵育或潛在破壞性清潔劑的情況下,可實(shí)現(xiàn)出色的組織滲透和清楚。
染色細(xì)胞,死的還是活的
具有Fc片段的常規(guī)免一球蛋白通常僅適用于固定樣本的標(biāo)記,因?yàn)榛罴?xì)胞的滲透性可通過Fc片段結(jié)合影響生物功能。缺乏Fc片段的納米體可用于活細(xì)胞的免一染色(Lelek等人,2021)
交叉吸附以獲得更好的特異性和更低的背景
JIR納米二級(jí)VHH抗體與常用物種交叉吸附,以降低背景并增強(qiáng)特異性。Jackson Nano Secondarys套件可以結(jié)合使用,生成非常具體的多標(biāo)簽圖像。
獲得全系列染料
使用共軛納米秒的間接標(biāo)記給研究人員提供了更多的實(shí)驗(yàn)范圍,允許他們使用熒光團(tuán)來利用在GFP等融合標(biāo)簽中克隆時(shí)可能無法獲得的波長。除了在蛋白質(zhì)上添加融合標(biāo)簽的潛在困難外,為了避免克隆,可以避免蛋白質(zhì)修飾產(chǎn)生的偽影,以提供更具代表性的功能數(shù)據(jù)(Lelek等人2021)。Jackson納米二價(jià)體可與紫外到遠(yuǎn)紅色的熒光結(jié)合,使研究人員在建立實(shí)驗(yàn)時(shí)具有樶大的靈活性,特別是那些識(shí)別多個(gè)目標(biāo)蛋白的實(shí)驗(yàn)。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 |
609-064-213 | Biotin-SP (long spacer) VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
615-064-214 | Biotin-SP (long spacer) VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
611-064-215 | Biotin-SP (long spacer) VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
609-474-213 | DyLight? 405 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
615-474-214 | DyLight? 405 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
611-474-215 | DyLight? 405 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
609-544-213 | Alexa Fluor® 488 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
615-544-214 | Alexa Fluor® 488 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
611-544-215 | Alexa Fluor® 488 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
609-164-213 | Cy?3 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
609-294-213 | Rhodamine Red?-X (RRX) VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
609-584-213 | Alexa Fluor® 594 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
615-164-214 | Cy?3 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
615-294-214 | Rhodamine Red?-X (RRX) VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
615-584-214 | Alexa Fluor® 594 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
611-164-215 | Cy?3 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
611-294-215 | Rhodamine Red?-X (RRX) VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
611-584-215 | Alexa Fluor® 594 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
609-604-213 | Alexa Fluor® 647 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
609-624-213 | Alexa Fluor® 680 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
609-654-213 | Alexa Fluor® 790 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
615-604-214 | Alexa Fluor® 647 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
615-624-214 | Alexa Fluor® 680 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
615-654-214 | Alexa Fluor® 790 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
611-604-215 | Alexa Fluor® 647 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
611-624-215 | Alexa Fluor® 680 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
611-654-215 | Alexa Fluor® 790 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
圖1.常規(guī)IgG與VHH的比較,駝科動(dòng)物如羊駝只產(chǎn)生重鏈IgG。IgG2和3的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域(Fab片段)不包含重鏈的CH1結(jié)構(gòu)域,并且輕鏈也不存在。
Jackson ImmunoResearch納米二抗是羊駝產(chǎn)生的多克隆VHH片段抗體(納米抗體)。它們對(duì)人、兔或小鼠具有特異性。小于15kDa的VHH片段抗體比傳統(tǒng)的全I(xiàn)gG抗體小10倍,非常適合需要良好穿透性的成像實(shí)驗(yàn)。納米二抗經(jīng)過交叉吸附處理,對(duì)目標(biāo)物種具有高度特異性,與其他常用物種的交叉反應(yīng)性極低,使其適用于多種標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。它們可與報(bào)告酶和一系列熒光染料結(jié)合,包括Alexa Fluor,為高分辨率免一組織化學(xué)和免一熒光提供了選擇。
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