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ATCC細胞的培養(yǎng)與凍存及復蘇技巧

日期：2024-09-28 15:13
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摘要：
ATCC提供了多種類型的培養(yǎng)基，包括DMEM、RPMI-1640、F-10等。消費者在選擇培養(yǎng)基時，需要根據(jù)細胞株的特性進行選擇。例如，很多腫瘤細胞株通常在DMEM培養(yǎng)基中生長良好，而**細胞則更適合在RPMI-1640中培養(yǎng)。此外，培養(yǎng)基中的高濃度糖類和氨基酸是維持細胞生命的關鍵。

ATCC細胞一般在37°C、5% CO2的環(huán)境下進行培養(yǎng)。確保培養(yǎng)箱的溫度和CO2濃度穩(wěn)定是至關重要的。過高或過低的溫度均會影響細胞的生長速度和形態(tài)，甚至導致細胞的死亡。此外，細胞在培養(yǎng)過程中需要適當?shù)臐穸龋苑乐古囵B(yǎng)基的蒸發(fā)帶來的濃度變化。

細胞凍存是細胞培養(yǎng)中的重要環(huán)節(jié)，通過低溫保存可以延長細胞的使用時間，從而便于后續(xù)實驗的開展。在細胞凍存和復蘇的過程中，掌握一些技巧是確保細胞成功存活的關鍵。

凍存前的準備

在對細胞進行凍存前，需要對細胞進行適當?shù)奶幚?。通常情況下，選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存效果最佳。此時，細胞增殖活躍，狀態(tài)良好，能夠提高凍存后的復蘇率。此外，使用適當?shù)膬龃嬉海ɡ绾?0% DMSO和90%培養(yǎng)基的溶液）可以保護細胞在冷凍過程中的損傷。DMSO能夠有效降低細胞內的冰晶形成，減少細胞損傷。

凍存過程中的注意事項

在凍存過程中，溫度的下降速率非常重要。細胞應當在-80°C下進行初步冷凍，通常在4小時內降到-80°C，隨后轉移至液氮中保存。需要強調的是，避免細胞在冷凍過程中遭受大于-130°C的沖擊，以防止細胞過度**。

復蘇后的處理

復蘇細胞時，應從液氮中迅速取出細胞，立即置于37°C的水浴中解凍，時間控制在1-2分鐘內，之后迅速轉移至培養(yǎng)基中，以洗去凍存液。洗滌是為去除DMSO，以防止其對細胞活性的影響。復蘇后的細胞應當置于適宜的培養(yǎng)環(huán)境中，并盡量減少光照，以促進細胞恢復。

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