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常用的Sigma試劑的制備方法介紹
日期:2025-04-19 19:05
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摘要:
Sigma試劑的制備涉及不同的領(lǐng)域和不同的試劑,因此,在這里羅列幾個(gè)常用的Sigma試劑的制備方法,僅供參考。
1. DNA/RNA抽提試劑
(1)準(zhǔn)備干燥后的植物組織或**等樣品,并將其粉碎成細(xì)粉狀。
(2)取1g粉末,加入10mL CTAB 溶液,室溫下震蕩,離心10分鐘。
(3)將上清轉(zhuǎn)入另一個(gè)離心管,加入等量的氯仿:異丙醇混合液。
(4)離心10分鐘,將上層水相轉(zhuǎn)入另一個(gè)離心管,加入等體積的以2%洗滌液穩(wěn)定的異丙醇混合液。
(5)反復(fù)沖洗3-4次,后離心去液。
(6)取脫色硅膠滲析純化,將純化后的DNA加入 TE 緩沖液中保存。
2. 蛋白質(zhì)電泳試劑
(1)將試劑A、試劑B、試劑C按1:1:1的比例混合,制成電泳緩沖液。
(2)準(zhǔn)備樣品,并進(jìn)行煮沸處理。
(3)將樣品和電泳緩沖液加入電泳槽中,進(jìn)行電泳。
(4)電泳結(jié)束后,將膠片進(jìn)行染色、洗滌操作。
(5)洗滌結(jié)束,將膠片烘干即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)試劑
(1)將DMEM降溫至4℃以下,將FBS、L-脯氨酸、青霉素/鏈霉素加入DMEM緩沖液中,再加入適量的純水。
(2)將溶液過(guò)濾**,并倒入剛**的試管中。
(3)將制備好的細(xì)胞懸液加入試管,并將試管放置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
以上便是幾個(gè)常用的Sigma試劑的制備方法,需要根據(jù)具體試劑作出相應(yīng)調(diào)整,同時(shí)注意合理的實(shí)驗(yàn)措施。

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